NK培養(yǎng)套裝是用于NK細(xì)胞體外激活、擴(kuò)增的專用無血清培養(yǎng)體系，適配外周血、臍帶血、凍存PBMC等多種樣本。
 

　　使用NK培養(yǎng)套裝該類產(chǎn)品需重點(diǎn)關(guān)注以下操作與環(huán)境注意事項(xiàng)：
 

　　‌試劑預(yù)處理要求‌
 

　　每次添加的培養(yǎng)基需提前取出放置培養(yǎng)箱中預(yù)溫至37℃，‌禁止將整瓶培養(yǎng)基放置37℃反復(fù)預(yù)溫‌，避免營養(yǎng)成分失活。
 

　　‌樣本處理時(shí)效要求‌
 

　　外周血采集后需在8小時(shí)內(nèi)完成PBMC分離，分離前血液、PBS、淋巴細(xì)胞分離液需提前平衡至20℃，全程室溫離心，保障單個(gè)核細(xì)胞活性。
 

　　‌培養(yǎng)基使用規(guī)范‌
 

　　提取PBMC、第0天接種、第3/5天補(bǔ)液階段必須使用激活培養(yǎng)基，不可提前切換為擴(kuò)增培養(yǎng)基，否則會(huì)影響NK細(xì)胞的激活效率。
 

　　‌接種密度控制‌
 

　　推薦接種密度為1.5×10?~2×10?個(gè)/mL，接種密度過低或過高，都會(huì)直接影響最終收獲的細(xì)胞總數(shù)和NK細(xì)胞純度。
 

　　‌操作細(xì)節(jié)要求‌
 

　　第3天補(bǔ)液時(shí)動(dòng)作需輕柔，不可將貼壁的激活細(xì)胞晃起；T25培養(yǎng)瓶需略微傾斜放置，避免液體溢出瓶口造成污染。
 

　　‌特殊樣本適配要點(diǎn)‌
 

　　使用臍血樣本時(shí)，需先用紅細(xì)胞裂解液去除殘留紅細(xì)胞后再計(jì)數(shù)，避免因計(jì)數(shù)偏差導(dǎo)致接種密度不符合要求，影響后續(xù)擴(kuò)增效果。
 

　　‌試劑存儲(chǔ)要求‌
 

　　未開封的無血清培養(yǎng)基需在2~8℃環(huán)境下避光保存，誘導(dǎo)因子類試劑需在-20℃環(huán)境下凍存，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致活性失效。